层析柱的制备一般先量取一定体积的溶剂(V0)，将层析柱的活塞稍打开，使溶剂滴入接收器中，同时将氧化铝慢慢地加入使它一面沉降，一面添加，直到加完为止。氧化铝加入速度不宜太快，否则将带入气泡而“破坏”层析柱。必要时可在层析管外轻轻给以振动，使氧化铝均匀下降，并有助于氧化铝带入的气泡外溢。当采用活性较高的氧化铝进行层析时，更应注意。待氧化铝加完后，仍使溶剂流动一定时间，然后将氧化铝柱上面的溶剂全部滴入接收器，量取接收器内溶剂量(V1)。从V0-V1之差，称为柱体积。这样，在层析过程中，我们就能主动掌握大致在什么时候开始收集流份。当变换溶剂的时候，就新换溶剂大致从何流份开始。

　　氧化铝的用量一般采用样品量的20～50倍，根据被分离化合物的性质而定。有时遇到碳氢化合物如萜烯、倍半萜烯等，氧化铝对这些化合物的吸附力较弱，层析时氧化铝用量略增，为样品量的100～200倍，而且为了尽量减少碳氢化合物在层析柱中扩散，层析过程中不能有间歇。

　　氧化铝层析柱的选择：

　　层析柱的装置，其内径与柱长的比例在1：10-1：20之间。有时由于特殊需要，例如两个或两个以上性质相近的成分的分离，为了提高分离效果，可适当采用细长的层析柱。

　　氧化铝层析是常用的层析方法，适用于亲脂性成分分离。广泛应用于生物碱、甾体化合物、强心苷、精油、内酯化合物等中药成分的分离。它具有价廉、分离效果好、再生容易、活性容易控制而能适应不同化合物层析要求等优点。但是氧化铝层析还有许多缺点，有部分酚性化合物(如黄酮类化合物)、部分酸性物质(如三萜酸)能与氧化铝结合而不能应用。

　　影响氧化铝层析的因素很多，实际操作时主要是选择具有适当活性和适当酸碱度的氧化铝，以及能充分发挥其分离效能的溶剂。

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